Elizabete Carmo-Silva bleibt über innovative Methoden der pflanzenwissenschaftlichen Forschung auf dem Laufenden, aber ein Aspekt ihrer Arbeit beschäftigte sie schon immer – das Verfahren zur Herstellung der Antikörper, die sie für ihre Forschung benötigt.

Traditionell umfasst der Prozess der Herstellung von Antikörpern für Forschungszwecke die Verwendung einer kleinen Anzahl von Tieren – typischerweise Kaninchen – die getötet werden, um ihre Blutprodukte zu verwenden. Sogar in den Pflanzenwissenschaften werden beispielsweise tierische Antikörper zur Charakterisierung eingesetzt Fülle an photosynthetischen Proteinen in Kulturpflanzen. Antikörper, die selektiv an interessierende Proteine ​​binden, werden mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert oder Isotope binden selektiv, um den Nachweis und die Quantifizierung zu ermöglichen.

In den letzten Jahren haben Fortschritte in der Technologie mithilfe von Zellkulturen begonnen, dies zu ermöglichen rekombinante Antikörperproduktion. Rekombinante Antikörper werden durch synthetische Zellkulturen hergestellt, wodurch der Einsatz von Tieren überflüssig wird.

„Diese Technologie gibt es schon seit Jahren, aber sie wurde in der Pflanzenforschung kaum genutzt, entweder weil die Wissenschaftler nicht wissen, dass sie eine Option ist, oder weil sie unerschwinglich ist“, sagte Duncan Bloemers, ehemaliger Doktorand im Carmo-Silva-Labor bei Lancaster University und jetzt Datenanalyst für LiNaEnergy.

Ein neues Buchkapitel von Bloemers und Carmo-Silva beschreibt, wie Pflanzenwissenschaftler diese Methode auf ihre Arbeit anwenden können. Das Kapitel, "Antikörperdesign zur Quantifizierung von Photosyntheseproteinen und ihren Isoformen" erscheint in Photosynthese: Methoden und Protokolle, ein Buch zum Austausch von Methoden, Protokollen und Best Practices mit der Photosynthese-Forschungsgemeinschaft. In dem Kapitel erfahren Sie, wie das Duo die Antikörper entwarf und entwickelte, die für die verschiedenen Isoformen ihres Proteins von Interesse (Rubisco-Aktivase) spezifisch sind, was an der Entwicklung beteiligt war und wie man validiert, dass die Proteine ​​von den Antikörpern richtig erkannt werden. Wichtig ist, dass Forscher mit diesen detaillierten Methoden Antikörper für nahezu jedes Protein herstellen und weiterhin ihre aktuellen Nachweismethoden wie Immunblotting und Western Blot verwenden können.

„Die Ethik unserer Forschung ist sehr wichtig“, sagte Carmo-Silva, Professorin für Pflanzenphysiologie und Hauptforscherin für Verwirklichung einer gesteigerten photosynthetischen Effizienz (REIF). „Wir sind denen sehr dankbar, die es ermöglicht haben, diese Strategie zu übernehmen und in unserem Labor einzusetzen. Wir hoffen, dass auch andere es nutzen werden.“

Lesen Sie das Kapitel:

Bloemer, D., Carmo-Silva, EA (2024). Antikörperdesign zur Quantifizierung von Photosyntheseproteinen und ihren Isoformen. In: Covshoff, S. (Hrsg.) Photosynthese. Methoden der Molekularbiologie, Band 2790. Humana, New York, NY. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-3790-6_21