Die Verbesserung der Kulturpflanzen zur Steigerung der Erträge und zur Milderung der Auswirkungen des Klimawandels ist durch unser Wissen darüber begrenzt, wie sich Genotypen auf Ganzpflanzen-Phänotypen auswirken. Der Schlüssel wird darin liegen, den Genotyp mit dem Phänotyp zu verknüpfen, nicht in abstrakten, statistischen Begriffen, sondern über messbare, molekulare Wege. Dieser Prozess ist eine Herausforderung, aber neue Rechenmodelle können uns helfen, diese Herausforderung zu meistern und neue Erkenntnisse zu liefern.

Dr. Yin Hoon Chew, derzeit Postdoctoral Research Associate an der University of Birmingham, und Kollegen erweiterten ein bestehendes Modell um Vorhersage des Biomassewachstums auf Organismusebene anhand des Genotyps basierend auf molekularen Signalwegen in einer neuen Veröffentlichung in in silico Pflanzen. Die Autoren verwendeten verschiedene metabolische und physiologische Daten, um mathematische Modelle der rhythmischen Genexpression, der Photoperiodenabhängigkeit, des Wachstums und des Stärkestoffwechsels innerhalb eines Rahmenmodells für das vegetative Wachstum von zu kombinieren und zu erweitern Arabidopsis thaliana.

Das Original Arabidopsis Framework-Modell Version 1 (FMv1) wurde entwickelt, um die zirkadianen Auswirkungen auf die Physiologie zu untersuchen. Es stellt die interagierenden, physiologischen Komponenten des vegetativen Wachstums dar Arabidopsis thaliana bis zur Blüte auf einfache, modulare Weise. Die Autoren erweiterten dieses Modell um:

  • ein Lichtsignalisierungs-Untermodell,
  • Stärkemobilisierung, die durch das Untermodell der zirkadianen Uhr gesteuert wird (anstelle einer festen Rate),
  • Niveaus von Malat- und Fumarat-Pools im Kohlenstoff-Untermodell und
  • zusätzliche RNAs, Proteine ​​und Proteinkomplexe innerhalb des circadianen Uhrwerks und in seinen Verbindungen zum Photoperiodismus.

Laut Chew „Die erste Arabidopsis Das Rahmenmodell zeigte, wie die zirkadiane Uhr die Anzahl der Blätter beeinflusst, indem sie die Blütezeit steuert, ohne dass sich dies direkt auf die Größe oder Masse der Pflanze auswirkt. Tatsächlich steuert die Uhr viele Prozesse im Zusammenhang mit dem Pflanzenstoffwechsel. Wir erwarteten, dass ein falsches Timing dieser täglichen Prozesse nicht nur das Entwicklungstiming, sondern auch die Biomasse der Pflanze beeinflussen würde. Es war nicht klar, welcher der uhrgesteuerten Prozesse die meisten Auswirkungen auf die Biomasse haben würde, und das ist eine Frage, die die Modellierung beantworten kann.“

The new Arabidopsis Framework Model Version 2 (FMv2) aktualisierte die simulierte Aufteilung von Kohlenstoff aus der Photosynthese am Tag in die vorübergehende Speicherung als Stärke in Blattzellen und die Verwendung dieser Speicher, um nachts Zucker bereitzustellen. Beide Modellvarianten variieren je nach Photoperiode den Anteil des gespeicherten Kohlenstoffs. Der „Wachstum zuerst“-Prozess im FMv1 passte nicht neuere Beweise, daher hat FMv2 eine vorsichtigere „Speicher zuerst“-Strategie, die zu den Stärkewerten der Pflanzen am Ende des Tages über die Photoperioden hinweg passt. Die rhythmische Ausgabe des Uhr-Genschaltkreises begrenzt, wie schnell die Stärkespeicher verwendet werden können, um einen Hunger zu vermeiden, bevor die Photosynthese im Morgengrauen wieder aufgenommen wird. Die Einführung dieser Kontrolle in FMv2 entsprach den Stärkewerten am Ende der Nacht.

Ein Diagramm mit Photoperiode auf der X-Achse und Stärke auf der Y-Achse. Die Stärkewerte am Ende des Tages sind viel höher als am Ende der Nacht. Bei den Stärkewerten am Tagesende stimmen die simulierten FMv2-Werte besser mit den gemessenen Daten überein als die FMv1-Werte. Für Startwerte am Ende der Nacht sind die simulierten Daten den gemessenen Daten ähnlich. FMv1-Werte stimmen jedoch besser mit gemessenen Daten überein als FMv2-Werte.
Stärkewerte am Ende des Tages (ED, gefüllt) und am Ende der Nacht (EN, offen) nach 30 Tagen unter verschiedenen Photoperioden (Sulpice et al. 2014) (Dreiecke), im Vergleich zu FMv1 (Quadrate), FMv2 (Kreise).

FMv2 wurde dann getestet, um zu sehen, ob es den beobachteten Rückgang der Biomasse erklären könnte prr7prr9 Langfristige Mutante, die eine 28-Stunden-Uhr hat. Das Modell sagte die höheren Stärkeniveaus, die in beobachtet wurden, korrekt voraus prr7prr9 Mutanten aufgrund ihres verzögerten zirkadianen Timings. Durch die Simulation des Ganzpflanzenkontextes des Rahmenmodells konnten die Autoren testen, ob diese Stoffwechseländerung ausreicht, um die Biomasse der Mutanten im Vergleich zu Wildtyppflanzen zu reduzieren.

Zwei Diagramme mit Tageszeit auf der X-Achse und Stärke auf der Y-Achse. Es werden sowohl Messdaten als auch Simulationsdaten angezeigt. In der linken Abbildung sind Wildtyp-Werte niedriger als lsf1-Werte. In den rechten Diagrammen werden prr7prr9-Werte angezeigt. Sie liegen zwischen lsf1- und Wildtyp-Werten. Für beide Diagramme stimmen die Simulationsdaten mit den gemessenen Daten überein, wobei die Stärkewerte um die Mittagszeit ihren Höhepunkt erreichten.
Daten (Symbole) und Simulation (Linien) von Stärke für WT- (Col, Kreise, grün), lsf1- (Dreiecke, orange) und prr7prr9-Pflanzen (Quadrate, blau).

Vorherige Arbeit zeigten, dass die Uhr die Biomasse beeinflusste, indem sie die Verwendung von gespeicherter Stärke in der Nacht veränderte. Eine milde Stärke verwendende Mutante, lsf1, zeigte eine reduzierte Pflanzenbiomasse in Übereinstimmung mit der FMv2-Vorhersage. Die FMv2-Ergebnisse zeigten, dass ein falsch getimter Stärkeverbrauch auch für den größten Teil des Biomasserückgangs bei den Uhrenmutanten verantwortlich sein könnte, deuteten aber darauf hin, dass auch ein anderer uhrenregulierter Prozess beteiligt war. Die Metabolitendaten der Autoren zeigten, dass die Mobilisierung von Malat und Fumarat in den Uhrenmutanten fehlreguliert war. Bei der Modellierung von sowohl Stärke als auch diesen entfielen alle Biomassedefekte auf Sekundärspeicher. Interessanterweise wurden keine Mängel im Chlorophyllgehalt und in der Photosyntheserate beobachtet prr7prr9 Pflanzen, obwohl sie war zuvor vorgeschlagen worden um das Wachstum anderer Uhrenmutanten in Arabidopsis zu beeinflussen.

Zwei Diagramme mit Tageszeit auf der X-Achse und Malat + Fumarat auf der Y-Achse. Es werden sowohl Messdaten als auch Simulationsdaten angezeigt. In der linken Abbildung sind die Wildtypwerte ähnlich, aber etwas niedriger als die lsf1-Werte. Simulationsdaten stimmen gut mit gemessenen Daten überein. In den rechten Diagrammen werden prr7prr9-Werte angezeigt. Sie sind höher als lsf1- und Wildtyp-Werte. Die simulierten Daten stimmen am besten mit den gemessenen Daten nach 12 Stunden überein, nicht so gut nach 24 Stunden und zu hoch zum Zeitpunkt 0. Für beide Diagramme erreichen die gemessenen Malat- und Fumaratspiegel gegen Mittag ihren Höhepunkt.
Daten (Symbole) und Simulation (Linien) von Malat und Fumarat für WT- (Col, Kreise, grün), lsf1- (Dreiecke, orange) und prr7prr9-Pflanzen (Quadrate, blau).

Chew schlussfolgert: „Der Erfolg von FMv2 zeigt, dass wir subtile Effekte auf der Ebene der gesamten Pflanze verstehen können, in diesem Fall nur durch die Änderung des Timings der Genexpression. Mit „verstehen“ meinen wir „erklären und vorhersagen“. Wir laden Arabidopsis-Forscher ein, die von uns geteilten offenen Daten zu ergänzen und dieses Modell zu erweitern, um ihre Fachgebiete zu untersuchen. Nicht alle Details dieses Modells lassen sich auf Nutzpflanzenarten übertragen, aber es erweitert die 'Proofs of Principle', um die Verbesserung von Nutzpflanzen auf molekularer Ebene zu informieren.“

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Foto des tatsächlichen Wildtyps, prr7prr9 und lsf1 Arabidopsis Mutanten, Simulationen der Biomasse dieser Pflanzen und simulierte Pflanzenbiomasse.

DER ARTIKEL::

Yin Hoon Chew, Daniel D. Seaton, Virginie Mengin, Anna Flis, Sam T. Mugford, Gavin M. George, Michael Moulin, Alastair Hume, Samuel C. Zeeman, Teresa B. Fitzpatrick, Alison M. Smith, Mark Stitt, Andrew J. Millar, The Arabidopsis Framework Modellversion 2 sagt die Auswirkungen einer Fehlregulation des zirkadianen Uhrgens auf Organismusebene voraus. in silico Plants, Band 4, Heft 2, 2022, diac010, https://doi.org/10.1093/insilicoplants/diac010


Dieser Artikel ist Teil der in silico Werk Sonderausgabe Integrative und Multiskalenmodellierung.

Das Rahmenmodell Version 2 ist frei verfügbar unter: https://fairdomhub.org/models/248. Die zum Erstellen und Testen des Modells verwendeten Daten werden geteilt unter: https://fairdomhub.org/investigations/123. Darüber hinaus ist eine einfachere Online-Version von FMv2 für Nicht-Experten verfügbar unter: http://turnip.bio.ed.ac.uk/fm/